:高中生物选修一教案：课题1 dna的粗提取与鉴定

课题1 DNA的粗提取与鉴定

教材内容解读

要点1 提取DNA的方法

（1）分离

选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。

（2）DNA的溶解性

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl的浓度变化，在0。14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，在0。14mol/L的NaCl溶液中DNA会析出。

DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。

（3）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性

蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

（4）DNA的鉴定

在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

要点2 实验设计

（1）实验材料的选取

选用DNA含量相对较高的生物组织，如鸡血。

（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液

动物细胞以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。

植物细胞需要先用洗涤剂溶解细胞膜。

（3）去除滤液中的杂质

方法有三种：

①在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0。14mol/L，析出DNA过滤去除溶液中的杂质，再用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。

②直接在滤液中加入嫩肉粉反应10～15分钟，嫩肉粉中的木瓜蛋白质酶能够分解蛋白质。

③将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15分钟。

（4）DNA的析出与鉴定

①析出较纯净的DNA

将处理后的溶液过滤，加入与溶液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2～3分钟，溶液中会出现白色丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。

②DNA的鉴定

取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的