1.基因工程是分子水平上的生物工程,其原理是基因重组。
2.基因工程的基本工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体,其中前两种工具是蛋白类的酶。3.基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。其中,目的基因的获取中构建基因文库实际上涉及基因工程的全过程。cDNA 文库只是部分基因文库的一种,cDNA文库中的目的基因通过反转录法人工合成,无启动子和内含子。PCR技术中解旋不用解旋酶。构建基因表达载体时,一般用同种限制性内切酶剪切目的基因和载体,再用DNA连接酶连接。目的基因的检测与鉴定中有分子水平检测和个体水平鉴定,其中检测目的基因是否导入受体细胞、是否转录出mRNA、是否翻译成蛋白质都属于分子水平检测。
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